Фальсификация лекарственных препаратов в Украине

Содержание

Список сокращений

Введение

1. Проблема фальсификации лекарственных средств (литературный обзор)

1.1 Классификация фальсифицированных лекарственных средств

1.2 Распространение контрафактной продукции в Украине

1.3 Трамадол и его свойства

1.4 БИК-спектроскопия

2. Экспериментальная часть

2.1 Объект исследования

2.2 Методы исследования

2.2.1 Метод БИК-спектроскопии с Фурье преобразованием

2.2.2 Метод спектрофотометрии ультрафиолетовой областИ

3. Фальсификация лекарственных средств в Украине (обсуждение результатов)

Выводы

Список литературы

Список сокращений

- «Good Manufacturing Practice» (Надлежащая производственная практика).

БИК-спектроскопия - ближняя инфракрасная спектроскопия.

ВОЗ - всемирная организация здравоохранения.

ГУМВД - Государственное управление министерства внутренних дел Украины.

ЛС - лекарственные средства.

МАО <#"517724.files/image001.gif">

Рис. 1.3.1. Структурная формула трамадол гидрохлорида.

Трамадол представляет собой рацемическую смесь <#"517724.files/image002.gif">

Рис. 1.4.1. БИК-спектрометр Antaris II.

Конструкция спектрометра позволяет укомплектовать один прибор различными приспособлениями для анализа различных типов образцов.

Спектрометр Antaris II оснащен:

·        модулем на пропускания для анализа жидких образцов и пластинок;

·        детектором на пропускание для анализа твердых образцов (таблеток, капсул, порошков);

·        интегрирующей сферой;

·        внешним оптоволоконным зондом.

Детектор для твердых образцов устанавливается над интегрирующей сферой, что позволяет одновременно проводить анализ образца как на пропускание, что дает характеристику всего образца в целом, так и на интегрирующей сфере методом диффузного отражения, что позволяет характеризовать поверхностную область образца. Внешний зонд используется для анализа методом диффузного отражения образцов в нестандартной упаковке, без вскрытия упаковки, а так же жидких образцов. Все вышеперечисленные методы не требуют пробоподготовки или требуют минимальной подготовки и позволяют получить результат в течение 3 минут, не требуют финансовых затрат на реактивы и расходные материалы, и, главное, являются неразрушающими, что позволяет сохранить образец для дальнейшего подтверждения результатов другим методами [12].

2       
Экспериментальная часть

.1 Объект исследования

Объектом исследования являлся фармацевтический препарат трамадол. Трамадол представляет собой лекарственное средство <#"517724.files/image003.gif">

Рис. 2.1.1. Структурная формула трамадол гидрохлорида.

Данный препарат - белый кристаллический порошок, хорошо растворим в воде, хлороформе, этаноле. Он не имеет запаха и горький на вкус [8].

Для исследования использовался препарат Трамадол (Tramadolum) производителя ОАО «Фармак», Украина (Киев), предоставленный в размере двух партий физико-химическим отделом НИЭКЦ при ГУМВД Украины в Донецкой области. Исследуемый препарат изображен на рис. 2.1.2.

Рис. 2.1.2. Трамадол (Tramadolum) ОАО «Фармак»

Международное и химическое названия: Tramadol; (±)-транс-2-[(диметиламино)-метил]-1-(3-метоксифенил)-циклогексанола гидрохлорид.

Основные физико-химические свойства: твердые желатиновые капсулы с крышечкой и корпусом зеленого цвета; содержимое капсулы - порошок белого цвета.

Состав: действующее вещество - трамадола гидрохлорид (0.05 г), вспомогательные вещества - сахар молочный, магния стеарат.

Форма выпуска: капсулы.

Фармакотерапевтическая групп: опиоидные анальгетики.

2.2 Методы исследования

Каждое лекарственное средство имеет свои отличительные черты, такие как химический состав вещества (качественная и количественная характеристика действующих веществ и наполнителя), физические характеристики (кристаллическая форма, размер частиц, морфология, термическая реакция) и визуальные характеристики (внешний вид, цвет, тип упаковки, ее отличительные особенности). Для идентификации контрафакта существует множество аналитических способов его выявления, которые используют одно ли несколько свойств препарата. К ним относятся: газовая, ионная, тонкослойная и жидкостная хроматографии; ИК-Фурье спектрометрия ближней, средней и дальней области; спектроскопия УФ видимой области, микроскопия, элементный анализ, калориметрия, масс-спектрометрия. Все эти методы имеют свои преимущества и недостатки, отличаются скоростью и точностью анализа, возможностью качественного или количественного анализа, финансовыми затратами и временем на проведение каждого анализа, возможностью характеристики физических или химических свойств препарата по одному или нескольким параметрам.

В данной работе исследование лекарственных средств производилось методами БИК-спектроскопии и УФ-спектрофотометрии.

2.2.1 Метод БИК-спектроскопии с Фурье преобразованием

Для выполнения анализа трамадола методом спектроскопии ближней инфракрасной области с Фурье преобразованием (БИК) первоначально было необходимо собрать базу данных по разным производителям, продукции из разных партий. Спектры были получены методом диффузного отражения, с разрешением 8 см^-1, с усреднением по 32 спектрам, время анализа с учетом снятия фонового спектра занимало около 3 минут. В методе использовался необработанный спектр и весь спектральный диапазон 10000 - 4000 см^-1. Для проведения анализа использовался спектрометр ближней инфракрасной области с Фурье преобразованием Antaris II (Thermo Fisher Scientific).

Для построения метода была создана библиотека, в которой сохранялись спектры каждой таблетки нескольких партий одного производителя и таблетки разных производителей. В результате этого, по препаратам была получена база, состоящая из 5 производителей трамадола, поступающего на рынок Украины. Для этого был использован 41 стандартный образец.

В качестве стандартных образцов, в базу занесены следующие препараты, представленные в табл. 2.2.1.1.

Талица 2.2.1.1

Стандартные образцы трамадола

Ниже представлены спектры стандартных образцов, содержащиеся в базе производителей трамадола:

Рис. 2.2.1.2. Спектр стандартного образца трамадола концерн «Стирол», Украина (Горловка).

Рис. 2.2.1.3. Спектр стандартного образца трамадола «KRKA», Словакия.

Рис. 2.2.1.4. Спектр стандартного образца трамадола «ALFARM», Индия.

Рис. 2.2.1.5. Спектр стандартного образца трамадола ОАО «Львовская фармацевтическая фабрика», Украина (Львов).

Для анализа использовался метод дискриминантного анализа, который позволяет идентифицировать образец, используя математическую обработку полученного спектра каждого образца. Для построения калибровки использовался данный набор стандартов, по которым по каждому отдельному виду (классу) образцов вычисляется усредненный общий спектр, который учитывает все особенности этого класса образцов. В дальнейшем для каждого спектра математически рассчитывается расстояние от представительного (усредненного) спектра каждого класса до спектра исследуемого образца. Для того, чтобы исследуемый образец был идентифицирован, должны быть выполнены несколько условий: расстояние до представительного спектра должно быть минимально из всех рассчитанных расстояний до всех других классов, и расстояние до представительного спектра не должно превышать установленное оператором максимальное значение. Это значение рассчитывается в процессе калибровки. При выполнении этих двух условий образец относится к определенному классу. В случае, если минимальное значение превышает установленный критерий, то образец не относится ни к одному из классов, но при этом указывается к какому классу он ближе всего расположен.

Полученный метод позволяет точно идентифицировать образец как трамадол, а также его производителя в том случае, если предварительно в калибровку были внесены спектры образцов этого производителя.

Исходя из вышесказанного, единственное требование для реализации данного метода является наличие стандартных образцов каждого исследуемого образца. Эффективность работы спектрометра ближней инфракрасной области зависит от базы данных по различным препаратам разных производителей.

.2.2 Метод спектрофотометрии ультрафиолетовой области

Исследование проводилось с целью установления количественного содержания трамадола гидрохлорида в исследуемых объектах. Точные навески исследуемых объектов массой по 0.007 г растворяли в 25 мл 0.1н соляной кислоты. Полученные растворы анализировали при 217 нм с помощью спектрофотометра ультрафиолетовой и видимой области Helios Gamma (Thermo Fisher Scientific, США).

фальсификация лекарство трамадол

3. Фальсификация лекарственных средств в Украине (обсуждение результатов)

Проблема фальсификации лекарственных препаратов в мире занимает одно из лидирующих мест, особенно актуальна она на сегодняшний день в Украине. Применение некачественных лекарственных средств может стать причиной серьезных негативных последствий для здоровья людей, поэтому производство и распространение фальсифицированных фармпрепаратов преследуется законом. Отслеживанием и выявлением подделок в Украине занимаются специальные государственные компетентные органы.

В Донецкой области проблемой идентификации фальсифицированных лекарственных средств занимается научно-исследовательский экспертно-криминалистический центр при ГУМВД Украины, где проводится большое количество различных исследований. С 2008 г. перед Донецким НИИЭКЦ особенно остро стоит проблема идентификации фальсификации фармакологического препарата трамадола, который внесен в реестр наркотических средств.

Трамадол представляет собой синтетический анальгетик, действующим веществом которого является трамадол гидрохлорид (или транс-(+-)-2-(диметиламинометил)-1-(3-метоксифенил) циклогексанола гидрохлорид). Данный препарат относится к классу агонистов опиоидных рецепторов и используется в медицине в качестве обезболивающего средства при болевом шоке и проведении болезненных диагностических или терапевтических мероприятий.

Целью данной работы был анализ на фальсификацию препарата трамадола и определение характера фальсификации путем установления количества действующего вещества. Исследования проводились методами БИК-спектроскопии с Фурье преобразованием и УФ-спектрофотометрии.

Объектом данного исследования являлся препарат «Трамадол» (Tramadolum) производителя ОАО «Фармак», Украина (Киев), предоставленный физико-химическим отделом НИЭКЦ при ГУМВД Украины в Донецкой области. Препарат представлял собой зеленые желатиновые капсулы, наполненные белым порошком, масса которого составляла 0.1 г. На исследование были предоставлены две капсулы препарата из разных партий, которым присвоили номера №1 и №2. Согласно правилу отбора проб, из обеих капсул извлекалось порошкообразное вещество. Пробу каждого предоставленного порошкообразного вещества тщательно растирали в агатовой ступке до получения однородной массы. Дальнейшие исследования проводились с полученными порошкообразными веществами.

Для исследования данных образцов трамадола методом БИК-спектроскопии с Фурье преобразованием использовался прибор Antaris II (Thermo Fisher Scientific). В методе использовался необработанный спектр и весь спектральный диапазон 10000 - 4000 см^-1. Время анализа с учетом снятия фонового спектра занимало около 3 минут. При выполнении данного анализа использовалась библиотека стандартных образцов, которой обладает Донецкий НИИЭКЦ. Она состояла из 5 видов препарата трамадола разных производителей, которые приведены в табл. 3.1:

Таблица 3.1

Стандартные образцы трамадола.

Для каждого препарата был снят и усреднен характерный вид БИК-спектра, на котором видны характеристические для трамадола пики. На рис. 3.1 приведены 5 спектров стандартных образцов трамадола. Красным выделены области локализации пиков, являющихся характеристическими для трамадола гидрохлорида.

Рис. 3.1. Спектры стандартных образцов трамадола разных производителей (1 - ОАО «Фармак», Украина; 2 - «KRKA», Словакия; 3 - концерн «Стирол», Украина; 4 - «ALFARM», Индия; 5 - ОАО «Львовская фармацевтическая фабрика», Украина)

Для анализа исследуемых образцов трамадола №1 и №2 были сняты их БИК-спектры, которые снимались при тех же условиях, что и спектры, занесенные в библиотеку стандартов. Далее с помощью компьютерной программы, используемой для работы с прибором и обработки спектров, производилось сравнение полученного спектра со спектрами, находящимися в библиотеке стандартных образцов. Программа автоматически идентифицировала к какому из веществ, находящихся в базе данных, ближе всего данный спектр. При этом было установлено, что оба исследуемых образца скорее всего являются препаратом «Трамадол» производителя ОАО «Фармак». Для того чтобы судить о достоверности данного результата, спектр исследуемого образца и предположительно соответствующий ему спектр стандарта подвергаются статистической обработке, а именно вычислению расстояния Махаланобиса. С помощью расстояния Махаланобиса можно определить сходство неизвестной и известной выборки <#"517724.files/image012.gif">

Рис. 3.2. Калибровочная прямая раствора трамадол гидрохлорида в соляной кислоте

Навески исследуемых объектов №1 и №2 массой по 0.007 г растворяли в 25 мл 0,1н соляной кислоты. В качестве сравнения использовалась 0,1н соляная кислота.

Оптическая плотность каждого из растворов исследуемых образцов измерялась трижды, а затем производился подсчет среднего арифметического. Результаты измерений приведены в табл. 3.3.

Таблица 3.3

Результаты анализа трамадола методом УФ-спектрофотометрии.

Исходя из полученных результатов, было рассчитано процентное содержание трамадола гидрохлорида (действующего вещества) относительно общей массы содержимого капсулы препарата. Установлено, что образец №1 содержит 50.5% действующего вещества, что считается нормой. А образец №2 - 38.2%, то есть наблюдается недостаток трамадол гидрохлорида, а это является фальсификацией.

Выводы

1.       Рассмотрена проблема фальсификации лекарственных средств, как в мировом масштабе, так и на территории Украины. Представлена классификация контрафактных лекарственных препаратов.

.        Исследовано две партии фармакологического препарата «Трамадол» (ОАО «Фармак») методом БИК-спектроскопии.

.        Обнаружено, что партия №1 является сертифицированным препаратом, а партия №2 является фальсификатом.

.        Методом УФ-спектрофотометрии выявлено, что фармакологический препарат партии №1 содержит 50.5% действующего вещества, что соответствует норме, а фармпрепарат партии №2 - 38.2%, а это является фальсификацией.

Список литературы

1.       WHO Drug Information - Режим доступа : <http://www.who.int/medicines/publications/druginformation/en/>

.        Deisingh A.K. Pharmaceutical Counterfeiting / A.K. Deisingh // Analyst. - 2005. - №130. - Р. 271-279.

3.       Шараева М.Л. Проблемы контроля за безопастностью лекарственных средств в Украине / М.Л. Шараева // Провизор. - 2004. - №21. - С. 15-17.

.        Мнушко З.Н., Бондарева Л.В., Пестун И.В. Фальсифицированные лекарственные средства: классификация, причины распространения, меры борьбы / З.Н. Мнушко, Л.В. Бондарева, И.В. Пестун // Провизор. - 2003. -  <http://www.provisor.com.ua/archive.php?year=2003>№17 <http://www.provisor.com.ua/release.php?code=200317>. - С. 24-30.

.        Гризодуб А.И. Проблемы качества и фальсификации лекарственных средств / А.И. Гризодуб // Еженедельник Аптека. - 2007. - №20. - С. 20-23.

.        Старенькая И. С. Проблема фальсификации лекарственных препаратов в Украине / И.С. Старенькая // Здоровье Украины <http://www.health-ua.org/golink/health-ua.com/>. - 2005. - №120 - С. 25-27.

8.       Машковский М.Д. Лекарственные средства: В 2 т./ - М.: Новая волна, 2002. - Т. 1. - С.157.

.        Патент на синтез трамадола. / П.В. Казаков, В.М. Русанов, Ю.И. Баранов и др. Гос. НИИ орг. химии и тех. - М., 2001. - 4с. - Рус. - Деп. в Гос. НИИ орг. химии и тех. 27.04.2001, №2165922.

.        Регистр лекарственных средств России: Энциклопедия лекарств: пособ. для студ. и врач. / Г.Л. Вышковский. -12 изд., - М.: ООО РЛС, 2004. - С. 867-871.

11.     Скафи С. Определение фальсифицированных наркотических препаратов методом инфракрасной спектроскопии ближнего действия, / С. Скафи, Ц. Паскьюни, // Аналитик. - 2001.- №126. - С. 2218-2224.

12.     Antaris II User's Guide: 269-191500 - USA : Thermo Electron Corporation. - 2007. - 276 p.